尊龙凯时即将提供关于人非小细胞肺癌细胞HCC-827的详细培养说明，包括细胞培养条件、处理步骤及售后条款等内容。对于希望研究与治疗非小细胞肺癌的科研人员来说，确保细胞培养的成功至关重要。

一、细胞培养条件

细胞名称：HCC-827
细胞类型：人非小细胞肺癌细胞
生长特性：贴壁生长
冻存条件：采用无血清冻存液（产品货号：C7001）
培养体系：1640培养基添加10% FBS
传代方法：建议首次传代比例为1:2；在传代过程中每两天更换培养液。请使用无菌离心管收集培养基，以便进行对比培养。如果对比效果不理想，建议直接采购我们的完全培养基。

二、细胞处理与培养步骤

收到细胞后，待其达到良好状态后，灌满完全培养液并封好瓶口，这样可以更好地运输细胞。处理步骤如下：

1. 收到细胞后，用75%酒精消毒整个细胞瓶，随后在超净台内进行操作。将细胞瓶放入37℃、5% CO2培养箱中静置3-4小时，以稳定细胞状态。

2. 使用显微镜观察细胞生长情况，同时对不同倍数拍照保存（建议40x, 100x和200x各一张）。前三天的照片是售后服务的重要依据，若未提供照片将默认细胞状态良好。

细胞传代步骤

a. 对于汇合度未超过80%的细胞，将培养基收集至离心管中，保留5ml完全培养基并放入37℃、5% CO2培养箱中培养；如果细胞密度超过80%，则可以进行传代。具体步骤为：

1. 弃去培养上清，用不含钙镁的PBS润洗细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中，于37℃培养箱中消化1-2分钟，观察细胞状态，若细胞大部分脱落，则轻敲培养瓶并加入5ml完全培养基终止消化。
3. 轻轻吹打细胞以确保完全脱落后，吸出悬液并转移至15ml离心管中，1000 RPM离心5分钟，弃去上清液，重新添加1-2ml完全培养基重悬细胞。
4. 按1:2比例进行分瓶传代（分为两个T25瓶），并补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃、5% CO2培养箱中继续培养。

细胞冻存步骤

b. 当细胞生长到约80%覆盖率时，弃去培养液并用PBS清洗一次；
添加0.25%胰蛋白酶消化液，然后轻轻吹打使细胞脱落，转移至离心管中并进行离心；
弃去上清，加入1ml尊龙凯时无血清冻存液，混匀后放入冻存管中；
将冻存细胞放在-80℃冰箱中保存，若后期需转入液氮罐，需在-80℃存放24小时以上。

细胞复苏步骤

c. 从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴解冻；然后将细胞转移至含5ml完全培养基的离心管中，进行离心并重悬后，接种至T25培养瓶，放于37℃、5% CO2培养箱中培养。

四、注意事项

某些细胞可能在运输过程中不稳定，容易脱落。请遵循培养步骤，确保细胞得到妥善处理。

五、售后条款

1. 若细胞在运输过程中出现问题（如丢失、瓶身破损等），可进行重发；细胞污染需在收到后48小时内联系支持团队；如细胞活性出现问题，需在7天内提供实验结果及照片，以便进行核实。
2. 具体情况下，非因尊龙凯时造成的细胞问题将不予重发，详情可咨询技术支持。

通过以上步骤与注意事项，科研人员能够更有效地进行HCC-827细胞的培养与应用。对于任何研究需求，欢迎选择尊龙凯时，我们将竭诚为您提供支持和服务。