摘要 本文展示了2024年9月中检院发布的两篇新研究，分别发表在Electrophoresis和Journal of Chromatography A期刊上，重点分析了多种半胱氨酸偶联抗体-药物偶联物（cys-ADC）的特性，尤其是电荷异质性的研究结果。

前言 这两篇文章均围绕cys-ADC展开，作为一种新兴的生物医疗产品，这些抗体-药物偶联物通过可裂解的连接子将细胞毒性药物与单克隆抗体相结合，能够精准识别癌细胞并实现靶向杀灭。这一机制不仅能够有效杀死癌细胞，还能在一定程度上降低高细胞毒性药物对患者的副作用。在本文讨论的cys-ADC中，单抗的轻重链间二硫键部分被还原，生成的自由巯基用于小分子药物的偶联，从而使得轻重链之间仅靠非共价力结合，便于采用非变性质谱技术（native MS）进行更精准的表征。

工作亮点 这两篇研究的主要亮点在于将成像等电聚焦毛细管电泳（icIEF）与非变性质谱技术结合，揭示了cys-ADC的电荷异质性。由于cys-ADC的单抗携带多种翻译后修饰，结合小分子药物，导致其异质性较高。而传统液质联用技术对于电荷异变体的分离能力有限，因此icIEF技术在电荷异质体的分离上具有明显优势，随后通过Orbitrap平台的高灵敏度非变性质谱技术对电荷异质峰进行在线完整蛋白分子量测定，进一步提升了表征的准确性。

结果与讨论 研究者通过NIST mAb标准品开发了icIEF-native MS方法，使用Advanced Electrophoresis Solutions Ltd的CE Infinite Automated Preparative icIEF System与Thermo Scientific™ Orbitrap™ Exploris™ 240超高分辨质谱仪进行分析。这一icIEF系统可灵活实现分析型、直连型和离线分馏收集功能，直连质谱不需额外购买单独的离子源接口，极大方便了实验。同时，AEstyle系列两性电解质则有效实现了电荷异质体的高分辨率分离，并减少了质谱污染。

使用icIEF-native MS流程对两个cys-ADC的电荷异质性进行分析，结果表明，两个cys-ADC在电荷异质峰的分布上存在细微差异，可能源于各自理化性质的不同，进一步体现了ADC分子特性复杂性及进行深入表征的重要性。值得注意的是，为了保证实验的合规性，研究中所使用的Thermo Scientific™ Chromeleon™ Chromatography Data System (CDS)软件对仪器控制及数据采集提供了极大的便利，切实满足了客户对于软件合规性的需求。

结论 两篇文章强调了icIEF-native MS技术在cys-ADC电荷异质性分析中的重要贡献，证明了这一技术在分析具有非共价相互作用分子的电荷异质性中具有广泛的应用潜力，能够提供全面的分子量信息以助于组分鉴定。对于有合规需求的客户，尊龙凯时品牌的软件使用将完美契合客户要求，进一步推动生物医疗领域的技术进步。