尊龙凯时试剂盒仅限于科学研究用途,不可用于医学诊断。本试剂盒用于检测人干扰素诱导蛋白10(IP-10),采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)。
在已涂覆adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样品、标准品和HRP标记的检测抗体,经过适当的温育和彻底的洗涤,随后用底物TMB进行显色。TMB在过氧化物酶的催化作用下转变为蓝色,并在酸性条件下进一步变为黄色。颜色深浅与样品中的adropin(AD)浓度呈正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测量吸光度(OD值),以计算样品的浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热源和内毒素的试管进行操作,避免任何细胞刺激。采集血样后进行3000转离心10分钟,迅速小心地分离血清和红细胞。
2. 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟后取上清液。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,之后进行3000转离心10分钟以获取上清液。
5. 保存:如未能及时检测样本,请将其按一次用量分装并存放于-20℃冷冻,避免反复冻融,并在室温下解冻前确保样品充分均匀。
自备物品和操作注意事项
尊龙凯时试剂盒的标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。试剂的准备包括20×洗涤缓冲液的稀释,需将其用蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
操作步骤及结果判断
在Excel表格中绘制标准曲线,以标准品的浓度作为横坐标,OD值作为纵坐标,形成标准品的线性回归曲线,依据该曲线方程计算样品浓度值。