通过单次局部注射腺相关病毒（AAV）载体，一些携带OTOF基因突变的常染色体隐性遗传耳聋9型（DFNB9）儿童的听力得到了部分恢复，这些研究有力地支持了基因疗法在治疗人类听力损伤方面的安全性和有效性。目前的研究表明，耳朵与大脑之间可能存在双向液体交换，因此，优化内窥镜和经乳突注射技术以降低耳蜗基因治疗的副作用成为当前的研究重点之一。新型AAV衣壳和基因编辑技术在动物模型中取得成功，有望进一步提升对耳蜗的靶向性。

本文将总结耳蜗基因疗法的新进展，探讨这些新方法在现有及未来临床试验中的转化潜力，并分析其在人类应用中需要解决的关键问题。

人工耳蜗植入物一直被视为帮助婴儿和成人恢复重度听力损失的主要技术，然而，其效果并不理想，约五分之一的植入者对结果感到不满意。此外，随着年龄的增长，语言理解能力的恢复成功率逐渐下降。导致结果差异的具体原因尚不完全明确，可能涉及信号处理策略、耳蜗内电极定位、手术方法及患者遗传特性等多种因素。值得注意的是，即使效果最佳的个体中，人工耳蜗也无法完全还原自然听力的质量，这使得频率分辨率下降、声音情感的感知和说话者的识别变得困难，同时增加了理解语言所需的认知负担。

近年来，基因治疗领域的快速发展为听觉的临床研究提供了越来越多的临床前证据。在美国、欧洲和中国，针对由OTOF基因突变引起的DFNB9型遗传性耳聋的首次人体试验相继启动。2024年1月，复旦大学附属耳鼻喉科医院的舒易来教授等人在国际知名医学期刊《柳叶刀》上发表了第一个先天性耳聋的基因治疗临床试验结果，确认了OTOF基因疗法的安全性和有效性。在对6名因OTOF双等位基因突变而听力严重障碍的患儿进行研究中，5名患儿的听力明显改善，听力阈值恢复至38-50分贝，并在术后26周内持续保持，同时，这些孩子的语言感知能力也有所提升。

由于otoferlin基因的cDNA长度超过了单个AAV递送的容量上限，研究人员采用将cDNA分段并通过两个AAV单独递送的方法，这一策略最早应用于Usher综合征1B型的基因治疗。目前，结合AAV2/1（与毛细胞特异性启动子结合使用）和AAV2/Anc80L65的双AAV递送策略已完成临床前测试，结果显示这两种AAV衣壳在多种不同物种中均能有效转导内毛细胞，即听觉系统的感觉细胞。

在基因递送的临床前研究中，通常选择新生啮齿动物（如小鼠）作为实验模型，因为这种模型中的耳蜗尚未完全成熟，手术创伤较小且操作难度较低。而未成年或成年动物更接近人类新生儿或儿童的耳蜗生理状态，因为人类胎儿的听觉功能在孕19至20周时开始发育。

局部注射是内耳基因疗法的首选给药方式，其原因在于血迷路屏障的存在使得内耳具有一定的“免疫豁免”特性。局部注射不仅可以在内耳液体中维持较高的治疗载体浓度，还能够降低与全身注射相比的副作用风险。

针对耳蜗基因递送的潜在组织脱靶效应和负面影响的研究仍然较少。有关研究显示，通过注射AAV载体，可以在小鼠的海马区域检测到一定比例的非靶向性转导，尽管没有观察到耳蜗或大脑的炎症反应。这些发现表明，通过CSF递送基因可能存在一定风险，可能会影响耳蜗以外的其他组织和细胞。

为进一步优化基因疗法的靶向性和减轻副作用，研究人员正在探索新型载体和AAV衣壳的工程技术，以及利用CRISPR基因编辑工具对特定与听力相关的基因进行修复。这些努力有望在未来实现更为高效且特异的基因疗法。

虽然基因疗法在小鼠模型中显示出恢复听力的潜力，但必须在大型动物模型，特别是非人灵长类动物中进行验证，以确保其安全性和有效性。狨猴作为一种重要的实验模型，由于其与人类的耳蜗解剖特征相似，成为了听力研究中的理想选择。

尊龙凯时致力于推动基因编辑和治疗的研究，提供从基因合成、载体构建到病毒包装的一站式服务，全面支持科研人员的基因编辑研究。我们还提供高质量NHP级别AAV载体产品，助力耳聋疾病的研究，帮助研究人员降低安全风险，提高疗效，并提供可靠的研究数据。

未来，基因疗法与人工耳蜗技术的结合将为患者提供更为个性化和全面的治疗方案。随着科学研究的深入，我们期待能够为更多患者带来恢复听力的希望。